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[UE 1] électrophorèse | ... | les differences entre les differentes électrophorèse(Tuteurs remerciés)

Question

...
adibou
Membre
Médecine Montpellier
Salut,
Je ne cerne pas bien les differences entre l'éctrophorèse mono, bi dimensionnelle ainsi que le western blot..
Merci d'avance
Par adibou le 10/12/2013 à 08h48 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte

Réponses

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Mathilde-b
Tuteur simple
Médecine Montpellier
Salut,

-Electrophorése mono-dimensionnelle:
Gel placé entre 2 électrodes (cathode - en haut et anode + en bas). L'electrophorése en condition non dénaturante est pas très utile car la séparation des protéines depend de plusieurs facteurs (PHi, PM).
L'electrophorése en condition dénaturante: le SDS donne une charge - à toutes les protéines donc elles vont toutes descendre dans le gel vers l'anode. Ainsi, la séparation se fait alors selon le poids moléculaire cad: Petites proteines descendent plus vite que les grosses dans le gel.
(Rem: on peut aussi faire en condition dénaturantes réducteur afin de casser les ponts S-S et donc de séparer les chaines en fonction de leur PM).

-Electrophorése bidimensionnelle:
Il y 2 séparations:
. 1é dimension= isoelectrofocalisation cad séparation en fonction du PHi par un gradient de PH: Par exemple le D (acide aminé acide) a un PHi bas, il migre le long du gradient jusqu'à arriver au Ph=Phi donc prés de l'anode.
. 2é dimension: Séparation en fonction du PM des molécules (comme pour l'Electrophorese monodimensionnelle).
Donc cette electrophorése biD sépare en fonction du PHi et du PM.

-Western Blot: Il y a d'abord une electrophorése monoD puis marquage par des AC colorés spécifique d'une proteine particuliére. (Ex: diagnostic de la myopathie de Duchenne quand absence de la distrophyne, proteine à haut PM).

C'est plus clair?
Bon courage!
Par Mathilde-b le 10/12/2013 à 11h38 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte
...
adibou
Membre
Médecine Montpellier
C'est bcp plus clair!!! Merci bcp..
Par adibou le 10/12/2013 à 14h51 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte

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