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[UE 2] Carillo/Méthodes d'études de la cellules/Localisation des constituants cellulaires | ... | GFP (Résolue)

Question

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Yoshi142
Membre
Pharmacie Montpellier
Bonjour !
J'ai une question concernant le TD1 (oui je revois mes TD que maintenant)
Au QCM8 a l'item A.L'observation d'une proteine marquée par la GFP ne peut s'effectuer que sur cellule vivante

Je ne comprend pas pourquoi l'item est faux. Car étant donné que la GFP s'inclut par transfection sur un géne si la cellule est morte je vois pas l'intérêt. De plus je n'ai pas trés bien compris la différence entre FRAP et GFP.

Voila
Merci
Par Yoshi142 le 04/11/2011 à 22h04 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte

Réponses

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Zob
Tuteur simple
Médecine Montpellier
Bonsoir,

Tu es sûr que la correction de l'item est bien fausse ? Parce que la GFP s'intègre au génome de cellules vivantes pour suivre le cheminement de protéines. Après peut être que la subtilité est sur "l'observation d'une protéine" (et non pas du devenir d'une protéine dans une cellule), ce qui voudrait dire que l'on peut observer une protéine isolée pour observer sa position dans la cellule à un instant donné (et donc sur cellule morte). Mais l'intérêt de la GFP est bien une étude cinétique, donc sur organisme vivant.

Ensuite, pour ce qui est de la distinction entre GFP et FRAP : le FRAP est une technique d'observation qui utilise la GFP (et ses dérivés de synthèse). On va fixer une protéine fluorescente sur la protéine d'intérêt (à observer), puis détruire la fluorescence par une illumination forte et observer le retour à la fluorescence. Cela va permettre d'observer le cheminement d'un protéine dans la cellule, ainsi que sa vitesse de déplacement.

Voilà rire

When I get sad, I stop being sad and be AWESOME instead. True story.

Par Zob le 05/11/2011 à 21h10 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte
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Yoshi142
Membre
Pharmacie Montpellier
D'accord merci beaucoup ! Oui je viens de reverifier la question est bien fausse c'est bizarre !

Par Yoshi142 le 07/11/2011 à 21h47 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte
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saturne
Membre
Médecine Montpellier
J'approuve c'est bizarre...
On peut en conclure que les colorants vitaux s'utilise pour tt types de coupes avant inclusion?

par rapport a ce même TD,
on nous dit:

la FRAP est realisésur un microscope a fluorescence simple: faux .... pourquoi?
Par saturne le 06/12/2011 à 15h01 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte
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Ca_Lime
Tuteur simple
Médecine Montpellier
Les colorants vitaux s'utilisent sur des cellules vivantes donc sans coupe.

Le FRAP se fait sur cellule vivante donc en milieu de culture donc le microscope doit être inversé.

Tuteur stagiare en UE 2 (cytologie/histologie/biocell) à l'UFR Médecine de Montpellier


Par Ca_Lime le 06/12/2011 à 18h13 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte
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saturne
Membre
Médecine Montpellier
ok j'ai compris je confondais l'observation de la GfluorescenceP avec le M a fluorescence -_-'

bref tout ca pour dire, finalement tout les colorants ( au niveau du MO) ne seront utilisé que pour:
- les microscopes a transmission ( absorption) donc plutot technique histologique usuelle ( contraste de phase aussi ?)
mais
-aussi via les M inversé adapté aux M a transmission
-et extemporané

Jfais un resumé trop grossié la ? oh le mal poli! ... (hum... desolé c'était trop tentant)
Par saturne le 06/12/2011 à 21h52 - Avertir les modérateurs Non respect de la charte

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